HiPerFect Transfection Reagent (0.5 ml)-miRNA/siRNA转染-转染试剂-优宁维分子生物学平台
HiPerFect Transfection Reagent (0.5 ml)
货号: 301704 品牌: Qiagen 库存: 公司缺货
规格: 0.5 ml
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价格: ¥ 2050.00

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概述
描述

Performance

各种悬浮细胞系以及分化和未分化的巨噬细胞已进行过检测,通过使用HiPerFect Reagent进行siRNA转染检测。许多细胞系可成功转染,并有效敲减靶基因表达(见表1)。使用HiPerFect Reagent转染对于一些需电穿孔转染的细胞类型来说是最佳选择。

表1.使用HiPerFect Reagent成功转染的细胞系
细胞系 细胞类型 siRNA的浓度 敲减
K562 人慢性髓性白血病 5 nM 85%
Jurkat 人T细胞 75 nM 83%
D1.1 人T细胞 50 nM 84%
RAW 264.7 小鼠巨噬细胞 25 nM 77%
J774.A1 小鼠巨噬细胞 50 nM 97%
PMA-differentiated THP-1 人急性单核细胞白血病 5 nM 82%
MEL 鼠红白血病 5-20 nM 50-70%

HiPerFect Reagent不适合转染的细胞系(见表2)。

表2.HiPerFect Reagent不适合转染的细胞系
细胞系 细胞类型
Raji 人B细胞
U937 人巨噬细胞
Molt4 人T细胞
Molt14 人T细胞
HL60 早幼粒细胞系
E6.1 人T细胞

当siRNA的浓度在1–50 nM之间时,可有效敲除(>80%)(参见"HiPerFect Reagent provides effective CDC2 knockdown")。使用1 nM siRNA转染的敲除率为86%,而5 nM siRNA转染的敲除率可达96%。最佳的siRNA使用浓度为1 nM(最少的脱靶效应并有效敲除,参见"Efficient transfection of NHEK")或5 nM(更高的敲除效率)。

Principle

siRNA转染可能发生脱靶效应,即siRNAs影响非同源或部分同源靶基因的表达,但在很大程度上可通过使用低浓度的siRNA避免。使用HiPerFect Transfection Reagent,可高效的转染和沉默基因,在某些情况下可使用10 pM siRNA。使用HiPerFect Transfection Reagent可在很宽的siRNA浓度范围内高效转染siRNA,可使研究者选择他们所需的siRNA浓度。可用于转染多种类型的细胞,包括:HeLa、HeLa S3、HEK 293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF。

miRNA研究

micro RNAs(miRNAs)是一类内源性小分子RNA,与siRNAs特点相同。miRNAs在多种生物过程中有重要作用,如生长、分化和调亡。转染合成的miRNA模拟物和抑制剂,是一种用于解释特定miRNAs的靶标和作用的技术。miRNA模拟物是一种化学合成的miRNAs,模拟转染细胞的自然产生的miRNAs。miRNA抑制剂是一种单链修饰RNAs,能够特异性抑制miRNA的功能。转染miRNA模拟物抑制基因的表达,或转染miRNA抑制剂增强基因的表达,由此证明目的miRNA调节该基因的表达。而且,miRNAs在各种信号通路中的作用也可通过检查转染miRNA模拟物或抑制剂后特异性的基因表型来确定。筛查实验也可通过检查转染大分子量miRNA模拟物或混合物后的基因表型来进行。HiPerFect Transfection Reagent用于真核细胞siRNA的高效转染,也可用于miRNA模拟物或抑制剂的低通量或高通量转染。

Procedure

HiPerFect Transfection Reagent是一种即用型溶液,只需将其加入已稀释的siRNA/miRNA溶液、混合、孵育并将混合物转移到细胞即可。转染可在有血清的条件下进行,无需去除细胞中的其他物质。除了HiPerFect Transfection Reagent Handbook中的实验方案,您可以在TransFect Protocol Database中找到适合您的细胞类型和培养瓶/培养皿的实验方案。该数据库提供您所需的确切的实验方案,而不是调整已有的实验方案,节省时间和精力。只需输入细胞类型、核酸和培养瓶的类型即可打印或下载QIAGEN转染实验方案的PDF格式。TransFect Protocol Database是免费的,且无需注册。

 HiPerFect Transfection Reagent转染,可使用常规的转染步骤,在转染前24小时种细胞。同时也提供使用96孔板和384孔板反转染的实验方案(见HiPerFect Transfection Reagent Handbook)。这些实验方案,可在同一天种细胞和进行转染。加入HiPerFect Reagent后,将siRNA/miRNA加入孔中。混合均匀后,将细胞加入孔中(参见"Reverse transfection using HiPerFect Transfection Reagent")。反转染实验方案快速、方便、可实现自动化,通常用于高通量实验。

Applications

即使siRNA浓度较低,HiPerFect Transfection Reagent也能够高效进行siRNA转染,适合多种应用,如:

  • RNA干扰研究
  • miRNA研究
  • 基因表达和功能研究
是否允许进口
允许
是否危险品
非危险品
性能
供应商
Qiagen
存放说明
15-25℃

参考图片

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